ИГХ исследование. Что это такое, как проводится, расшифровка

Иммуногистохимический анализ (ИГХ исследование) впервые появилось ещё в 1941 г., но свою популярность это направление получило лишь в конце XX в.

Что это за исследование, стоимость

ИГХ исследование – это диагностический метод, который направлен на выявление точной локализации опухолевого компонента (антигена), благодаря его связыванию с антителами. На данный момент иммуногистохимический анализ широко применяется в лечебных учреждениях онкологического профиля.

Благодаря широкому внедрению этого метода исследования, патологи смогли с точностью понимать, какой вид опухоли они рассматривают.

Этот метод представляет собой уточняющий вариант диагностики и служит для более точной постановки диагноза. Он позволяет дифференцировать опухолевый процесс и более точно определять, к какому виду опухоль относится. Но нужно отметить, что этот диагностический метод применяется не только в онкологии, но также он широко применяется в инфекционных болезнях.

Механизм диагностики состоит в том, что клетки несут в себе множество разных рецепторов. Когда клетки начинает приобретать новые для себя свойства, видоизменяться, они выделяет определённые рецепторы. Благодаря иммуноцитохимии, можно распознать молекулярный рецептор структуры клетки. Метод построен на реакции «антиген – антитело».

Антиген – это вещество, которое содержит белок. Он, в свою очередь, является составной частью клеток человеческого организма. И может содержаться как в здоровых клетках, так и быть одной из частей «атипичных» клеток и инфекционных агентов.

Антитело – это вещество, которое вырабатывается иммунной системой организма в ответ на обнаружение антигена.

Если назвать суть исследования простым языком, то этот анализ представляет собой лабораторную модель иммунной реакции, происходящую в организме человека.

С помощью ИГХ – исследования можно выявить:

• Инфекционные агенты (в особенности вирусы).
• Определённые рецепторы клетки (которые появляются в процессе её изменения).
• Клеточные продукты (иммуноглобулины, гормоны и ферменты).

Цены на иммуногистохимическое исследование варьируются в зависимости от региона, где пациент хочет его сделать. В среднем стоимость ИГХ исследования составляет около 10 тыс. руб. А также стоимость зависит от показаний для проведения исследования.

ИГХ исследование – это диагностический метод, который также можно сдать бесплатно по полису ОМС (обязательное медицинское страхование). Но для этого пациент должен находиться на стационарном лечении в отделении онкологического профиля. Диагностику также можно провести в частных лабораториях или в крупных онкологических центрах.

Цель исследования

Целью имммуногистохимического исследования является:

• Оценка биологической структуры клетки (её рост, возможность перерождения в раковую клетку, чувствительность к определённым видам противоопухолевой терапии, дифференцирование клетки). Чем ниже дифференцировка раковой клетки, тем не благоприятнее прогноз.
• Выявление патологического процесса на ранних стадиях развития.
• Определение вида терапии (нужно ли хирургическое вмешательство или можно обойтись применение химиопрепаратов).
• Оценка прогноза для жизни пациента от вида опухоли.
• Дифференцирование опухолей кроветворной системы от лимфоидных опухолей.
• Установление тканевой принадлежности (в случае, когда опухоль не дифференцируется гистологически).
• Определение степени злокачественности опухоли.
• Выявление первичного очага опухоли (при невозможности клинически его обнаружить).

Если говорить кратко, то основная цель иммуногистохимического анализа заключается в диагностике, лечении и профилактике.

Показания к ИГХ

Показаниями для проведения исследования служат:

• Определение степени злокачественности опухолевого процесса.
• Оценка прогноза лечения.
• Контроль эффективности противоопухолевой терапии.
• Подозрение на рак шейки матки и дифференциальная диагностика предраковых состояний.
• Определение чувствительности опухолевых клеток к определённым видам терапии.
• Диагностика нейроэндокринных опухолей.
• Отсутствие первичного очага опухоли и поиск его метастазов.

Отдельные заболевания и применяемые для их диагностики антитела

Основные злокачественные опухоли, при диагностике которых используется иммуногистохимический метод:

• Рак легкого.
• Рак шейки матки.
• Рак молочной железы.
• Меланома (рак кожи).
• Рак предстательной железы.
• Рак желудка.
• Лимфомы.

Меланома является злокачественной опухолью, возникающей из меланоцитов. Чаще всего возникает из доброкачественного невуса (родинки), но может быть локализована и в других местах. Например, выделяют меланому слизистой оболочки носа, меланому ногтевого ложа, меланому слизистой оболочки глаз. Но чаще всего встречается классическая форма – это перерождение невуса.

Меланома отличается степенью своей злокачественности от других опухолей. И характеризуется её высокой степенью, может за короткий промежуток времени распространить метастазы по всему организму. Излюбленная локализация метастазов меланомы – это головной мозг, костная система, лёгкие и желудочно-кишечный тракт. Кроме этого, поражаются также регионарные лимфатические узлы.

Заподозрить меланому можно по изменению цвета, формы и размера родинки. При развитии опухолевого процесса родинка меняется, её края становятся неровными, родинка начинает быстро расти. Наблюдается изменение её цвета, окраска становится более тёмной. А также родинка может болеть, кровоточить. Нередко пациенты жалуются на усиленный зуд кожи в области невуса.

Диагностикой меланомы служит клинический осмотр родинки, её биопсия. Часто применяется иммуногистохимическое исследование. Особенно оно важно при отсутствии первичного очага меланомы.

Описаны случаи в клинической практике, когда у пациента так и не удалось установить первичный очаг. Но при этом присутствовало опухолевое образование, в структуре которого были выявлены клетки меланомы.

В диагностике меланомы выделяют следующие маркеры:

• S-100. Этот антиген встречается только при меланоме. Его отсутствие или наличие позволяет дифференцировать меланому от других похожих опухолей кожи.
• Р. Оценивает степень деления злокачественных клеток.
• Ki-67. Его наличие позволяет оценить степень разрастания опухолевых клеток. Таким образом, это позволяет врачу оценить прогноз для жизни пациента. Оценивается дифференцировка опухолевых клеток, чем она ниже, тем хуже прогноз.
• HMB-45. С помощью этого маркера можно оценить функцию меланоцитов.
• bcl2. С его помощью можно оценить риск метастазирования опухоли в другие органы и ткани.

Рак молочной железы занимает 3-е место среди всех онкологических заболеваний исходя из их распространённости. Представляет собой опухолевое образование в тканях молочной железы. У женщин эта патология встречается намного чаще, чем у мужчин.

Главными симптомами является появление припухлости в области молочной железы, выделения из сосков, увеличение подмышечных лимфатических узлов, повышение температуры тела.

Главным методом обнаружения опухолевого процесса является биопсия с последующим иммуногистохиимическим исследованием.

ИГХ представляет собой основное исследование, которое назначается для установления точного диагноза. Эта методика позволяет достоверно определить стадии заболевания и его тяжесть, а также спрогнозировать степень успешности лечебной терапии.

Основные маркеры рака молочной железы:

• PR, ER. Представляют собой специфические белки, которые реагируют на повышение уровня гормонов в организме. Большинство видов опухолей молочной железы являются гормонозависимыми.
• Ki 67.
• HER-2/neu.
• Эстроген — рецептор.
• Прогестерон — рецептор.

Можно сказать, что какая-то специальная подготовка к анализу не ведётся, так как иммуногистохимическое исследование проводится на поражённом участке ткани, который был взят у пациента во время биопсии.

Рак лёгкого – это наиболее частая причина смерти среди других онкологических заболеваний. Чаще всего встречается среди мужчин.

Главными симптомами, которые могут свидетельствовать о развитии патологического процесса, является длительный кашель без признаков инфекционного процесса, одышка, повышение температуры тела в ночное время.

Как правило, длительное время имеет скрытое течение, как и большинство других онкологических заболеваний. Диагностируется случайно, при проведении флюорографического исследования. В некоторых случаях на момент диагностики опухоль лёгкого может иметь стадию, при которой активно идёт процесс метастазирования.

Изначально прогноз рака лёгкого является неблагоприятным для пациента.

В диагностике опухоли лёгкого не обходится без применения иммуногистохимического анализа. Специфические маркеры также различаются от видовой принадлежности опухоли.

Основные маркеры рака лёгкого:

• Повышение наблюдается при мелкоклеточном раке лёгкого.
• Cytokeratin 14, Cytokeratin 5/6, CEA, EGFR. Наблюдается их наличие при плоскоклеточном раке лёгкого.
• EMA, cytokeratin. Выявляется при аденокарциноме.
• C Наличие этого маркера наблюдается при мелкоклеточной карциноме лёгкого.

Рак предстательной железы встречается у мужчин в основном после 50 – летнего возраста. И встречается почти так же часто, как и рак лёгкого. В связи с тем, что онкологическое заболевание предстательной железы может не иметь каких-либо клинических симптомов, основную роль отдают диагностическим методам. В том числе диагностические мероприятия у пациентов, входящих в группу риска.

Основные маркеры рака предстательной железы:

• PSA.
• Androgen receptor.
• Ki-67.

ИГХ исследование – это один из основных анализов при подозрении на лимфому.

Лимфомы составляют группу злокачественных опухолей лимфатической системы. Различают лимфому Ходжкина (лимфогранулематоз) и неходжкинские лимфомы. Лимфогранулематоз прогностически является более благоприятным видом лимфопролиферативных заболеваний.

Опухолевые клетки этого вида онкологии лучше всего поддаются химиотерапии и обладают высоким уровнем дифференциации. Пик заболеваемости приходится на детский и молодой возраст (около 20 лет).

Первыми симптомами лимфом является увеличение лимфатических узлов. В особенности надключичных и шейных. А также наблюдается увеличение лимфоузлов средостения. Кроме этого, наблюдается повышение температуры тела, кожный зуд и обильное ночное потоотделение.

Этиологическими факторами развития лимфом служит вирусные заболевания, в том числе вирус Эпштейна – Барр и ряд других.

Главным методом диагностики в современной онкогематологии является иммуногистохимический метод исследования. Это позволяет выявить тип опухолевых клеток, степень их злокачественности. А также с помощью этого метода лимфомы можно дифференцировать от других видов лимфопролиферативных заболеваний.

Основные маркеры лимфом:

Название	Перечень маркеров
Лимфома Ходжкина	CD20, CD3, CD15, CD30, CD45, EMA.
Неходжкинские лимфомы	CD20, CD3, CD5, CD43, CD10, BCL6, BCL2, cyclin D1

Рак желудка представляет собой злокачественное новообразование слизистой оболочки желудка. Встречается почти так же часто, как рак лёгких и рак молочной железы. Отличается высокой степенью злокачественности. Основной пик заболеваемости приходится на пожилой возраст после 60 лет.

Часто первым симптомом рака желудка становится болевой синдром в эпигастральной области, но иногда он может протекать и бессимптомно. Рак желудка может развиваться из предраковых состояний, например, из язвы желудка.

ИГХ исследование в случае с раком желудка служит уточняющем методом. Так как гистологическое исследование опухоли всегда даёт исчерпывающие данные.

Иммуногистохимический анализ нужен в том случае, если первичный очаг опухоли не выявлен (при метастатическом поражении желудка) или, когда гистологическое исследование не может полностью дифференцировать опухоль желудка от других опухолей желудочно-кишечного тракта.

Основные маркеры рака желудка: CK18, CK19, CK7, CK20.

Хронический эндометрит – представляет собой воспалительный процесс в слизистой оболочке матки (эндометрий). Возникновение эндометрита тесно связано с воздействием инфекционных агентов. Инфицирование слизистой оболочки матки возникает вследствие родов, абортов и других вмешательств на органы малого таза. А также возможно инфицирование эндометрия из других органов.

Воспаление приводит к развитию патологических изменений в репродуктивных органах и в некоторых случаях к бесплодию.

Во время диагностики выявляются следующие антитела:

• C20.
• CD56.
• CD138.
• HLA-DR.

Рак шейки матки представляет основную опасность для репродуктивной системы женщины и занимает 2-е место по частоте после рака молочной железы у женщин. Описаны случаи, когда у пациентки были выявлены два вида онкологии.

Симптомами рака шейки матки являются длительные менструальные кровотечения, боли внизу живота. Часто рак шейки матки перерождается из эрозии, которая является предраковым состоянием. Не последнюю роль играет и вирус папилломы человека, который может спровоцировать развитие заболевания (при выявлении онкогенного штамма).

Основные маркеры:

• Эстроген рецептор.
• Прогестерон рецептор.
• Определение вирусного профиля.
• KI 67.

Подготовка к исследованию

Для пациента специфической подготовки не выделяется.

Ход исследования и сроки выполнения

ИГХ исследование – это метод, который требует кропотливой работы. Поражённый материал забирают из организма пациента путём биопсии или трепанобиопсии (при подозрении на лейкоз), а также из материала, полученного во время операции.

Можно также брать отделяемое с помощью соскоба. Чтобы диагностика была достоверной, весь материал разделяют по локализации, из которой его забирали и маркируются перед отправкой в лабораторию.

С помощью такого анализа можно проводить также исследование различных жидкостей. Но в этом случае анализ носит название иммуноцитохимического метода.

В кратчайшее время после забора материал должен быть доставлен в лабораторию. Так как при пребывании в воздушном пространстве клетки теряют свои антигенные свойства.

После забора материал подготавливают для дальнейшего исследования, обезжиривают и заключают ткань в парафиновые блоки. Затем делают тончайшие срезы. Затем препарат помещается в специальный препарат для окрашивания. После этого готовый препарат передают врачу – патологоанатому для дальнейшего изучения.

При окрашивании образцов ткани будут выделены определённые антитела, которые чувствительны к этому типу опухоли. После этого врач описывает морфологическую структуру материала, перечисляет количество увиденных клеток и степень их окрашивания. А после этого выдаёт заключение с описанием.

Длительность проведения исследования зависит от лаборатории и её загруженности. Но, как правило, процесс занимает около 10 дней. Но временной промежуток также может меняться, в среднем роки выполнения этого исследования от 7 до 14 дней.

Расшифровка результатов

При расшифровке анализа учитывается количество клеток, которые были обнаружены в исходном материале, а также степень их окрашивания.

Какая норма

В норме количества клеток, которые чувствительны к определённым антителам, быть не должно. При этом оценка количества клеток составляет от 0 до 1 балла. Это свидетельствует об отсутствии патологии.

Отклонение от нормы

Отклонениями от нормы считается обнаружение чувствительных к определённым антителам клеток. Их количество оценивается от 2 до 3 баллов.

При оценке пролиферативной активности клеток отклонением от нормы считается показатели выше 16%.

Невозможно представить современную медицину, а в особенности онкологию без иммуногистохимического метода.

Несмотря на то, что сейчас существуют ещё более современные методы, этот анализ остается одним из самых важных в клинической практике. Без ИГХ исследования не будет более точной диагностики, а это неизменно приведёт к неправильной постановке диагноза и к осложнениям во время проведения лечения.

Видео об ИГХ

Про иммуногистохимические исследования: